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活细胞水平上改变基因启动子内特定顺式作用元件甲基化修饰水平的方法
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本发明公开了活细胞水平上改变基因启动子内特定顺式作用元件甲基化修
饰水平的方法。所述的方法包括以下步骤:(1)构建目的基因野生型启动子荧光
素酶载体;(2)构建带有特定限制性内切酶位点的目的基因突变型启动子荧光素
酶载体;(3)获得目的基因启动子区仅特定顺式作用元件高甲基化(>90%)的
环形pGL3 质粒。将所得环形质粒直接转染U251 细胞,利用荧光素酶报告系统
分析各顺式作用元件甲基化修饰改变对基因启动子活性的影响。通过特定序列甲
基化再环形质粒法,实现了活细胞内目的基因启动子上特定顺式作用元件甲基化
修饰水平的改变,以此方法可深入探讨同一启动子内不同顺式作用元件甲基化修
饰水平变化对基因转录活性的影响。
商品类型 技术成果 项目阶段 研制 技术领域
专利号 cn201410723374.6 成果权属 独占 知识产权状况 专利
高新技术领域分类 生物与新医药 交易方式 技术转让 信息有效期至 长久有效
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